Avaliação do potencial fotossensibilizador de um corante esquarílico ao nível mitocondrial

Data
2015
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Resumo
A terapia fotodinâmica (PDT- photodynamic therapy) é uma terapia que se tem manifestado bastante promissora no tratamento de várias doenças, sendo principalmente dirigida a alvos oncológicos. Esta técnica requer a utilização de um fotossensibizador, que é administrado ao paciente, e a utilização de uma fonte de luz num comprimento de onda adequado [Avirah et al., 2012]. É a estrutura do fotossensibilizador que vai influenciar a sua acumulação nos diferentes compartimentos a nível subcelular [Reis et al., 2009]. No entanto existem evidências que levam a considerar a mitocôndria como o principal alvo dos fotossensibilizadores. Isto deve-se ao facto de após irradiação o corante provocar uma série de eventos que causam danos mitocondriais e a consequente morte celular por apoptose [Pessoto et al., 2009]. Neste trabalho foi avaliado o efeito de um corante esquarílico (Fig.1) sobre a funcionalidade mitocondrial e o seu potencial como indutor de apoptose. O corante foi previamente sintetizado e devidamente caracterizado por Fagundes (2013). Na realização dos ensaios foram utilizadas mitocôndrias hepáticas isoladas de fresco a partir de fígado de rato (Rattus novergicus). Foi avaliado qual o efeito toxicológico do corante a nível mitocondrial. Realizaram-se ensaios com diferentes concentrações de corante na presença e na ausência de luz com comprimento de onda adequado avaliando a funcionalidade mitocondrial, a atividade dos complexos respiratórios, assim como a produção de ROS (espécies reativas de oxigénio) por parte da mitocôndria. O estudo incidiu ainda sobre a avaliação de alguns indicadores de indução de apoptose como a abertura do poro de permeabilidade transitória e libertação do citocromo c. Os resultados obtidos mostraram que o efeito citotóxico, previamente observado em células HepG2, resulta duma ação ao nível da mitocôndria.
Photodynamic therapy (PDT) is a therapy which has shown very promising in the treatment of various diseases and are primarily directed to cancer targets. This technique requires the use of a photosensitizer, which is administered to the patient, and the use of a light source in a suitable wavelength [Avirah et al., 2012]. It is the structure of the photosensitizer that will influence their accumulation in different subcellular compartments to level [Reis et al., 2009]. However there is evidence that lead to consider the mitochondria as a major target for photosensitizers. This is due to the fact that the dye after irradiation trigger a series of events that cause mitochondrial damage and consequent cell death by apoptosis apoptosis [Pessoto et al., 2009]. In this study the effect of a squarilic dye (Figure 1) on mitochondrial functionality and their potential to induce apoptosis was evaluated. The dye was previously synthesized and fully characterized by Fagundes (2013). In the tests used were freshly isolated liver mitochondria from rat liver (Rattus norvegicus). It was evaluated the toxicological effect of the dye mitochondrial level. Assays were performed with different dye concentrations in the presence and absence of light with suitable wavelength evaluating mitochondrial functionality, the activity of the respiratory complexes, as well as the production of ROS (reactive oxygen species) by the mitochondria. The study focused on the further evaluation of some apoptosis-inducing indicators such as the opening of the permeability transition pore and release of cytochrome c. The results showed that the cytotoxic effect previously observed in HepG2 cells, results from a share level of mitochondria.
Descrição
Dissertação de Mestrado em Bioquímica
Palavras-chave
Bioquímica , Corantes esquarílicos , Mitocôndrias , Terapia fotodinâmica
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