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Title: Caraterização de resistência a antibióticos e biofilmes de Staphylococcus aureus resistentes à meticilina isolados de septicemias
Authors: Hermenegildo, Sara Letícia Pimenta
Advisor: Poeta, Patricia Alexandra Curado Quintas ...
Silva, Vanessa Natália dos Santos
Keywords: Resistência a antibióticos
Staphylococcus aureus
Issue Date: 28-Oct-2019
Abstract: Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) representa um dos principais agentes nosocomiais causadores de septicemia e é altamente resistente a quase todos os antibióticos beta-lactâmicos. Para além dos diversos mecanismos de patogenicidade que tornam S. aureus eficaz na sua capacidade de causar doença, este apresenta ainda uma elevada aptidão na formação de biofilmes em biomateriais, o que leva a uma maior preocupação clínica em pacientes com dispositivos médicos internos. O objetivo deste trabalho é caracterizar fenotipicamente e genotipicamente MRSAs provenientes de septicemias. Treze isolados de MRSA foram recuperados de pacientes com septicemia internados no Centro Hospitalar de Trás-os-Montes e Alto Douro entre 2016 e 2019. A suscetibilidade desses isolados foi testada pelo método de difusão em disco Kirby-Bauer contra 13 agentes antimicrobianos e de acordo com as diretrizes do EUCAST (2018). Os agentes antimicrobianos utilizados foram penicilina, gentamicina, mupirocina, cefotoxina, ciprofloxacina, eritromicina, ácido fusídico, clindamicina, linezolida, tobramicina, canamicina, timetroprim-sulfametoxazol e tetraciclina. Os genes de resistência, virulência e biofilme foram estudados nas estirpes de MRSA utilizando primers e condições específicas. Neste estudo, 92% das estirpes mostraram resistência a pelo menos 3 classes diferentes de antibióticos sendo consideradas multirresistentes. Os isolados apresentaram resistência à penicilina (n=13), oxacilina (n=13), ciprofloxacina (n=13), cefoxitina (n=12), eritromicina (n=9), ácido fusídico (n=1) e clindamicina (n=1). Isto foi confirmado pela presença dos genes: ermA, ermC, mphC, blaZ, msrA/B e vgaE. Os genes de virulência encontrados foram os seguintes: hla (n=11), hlb (n=8) e etA (n=7). Os genes relacionados com a produção de biofilmes foram expressos em pelo menos 8 isolados. Conclui-se que é necessária uma melhor compreensão relativamente às características de cada estirpe causadora da infeção, bem como os padrões de suscetibilidade antimicrobiana, para auxiliar na escolha da melhor terapia e na correta eliminação do biofilme, numa perspetiva “One Health”
Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) represents one of the major nosocomial agents causing septicaemia and is highly resistant to almost all beta-lactam antibiotics. In addition to the various mechanisms of pathogenicity that make S. aureus effective in its ability to cause disease, it still presents a high ability to form biofilms in biomaterials, which leads to a greater clinical concern in patients with internal medical devices. The objectives of this study are to characterize phenotypically and genotypically MRSAs from septicaemia. Thirteen MRSA isolates were recovered from patients with septicaemia hospitalized at Hospital Center of Trás-os-Montes and Alto Douro between 2016 and 2019. The susceptibility of these isolates was tested by the Kirby-Bauer disk diffusion method against 13 antimicrobial agents and according to EUCAST (2018) standards. The antimicrobial agents used were penicillin, gentamicin, mupirocin, cefotoxin, ciprofloxacin, erythromycin, fusidic acid, clindamycin, linezolid, tobramycin, kanamycin, thymetroprim-sulfamethoxazole and tetracycline. The resistance, virulence and biofilm genes were studied in MRSA strains by using specific primers and conditions. In this study, 92% of the strains showed resistance to at least 3 different classes of antibiotics being considered multiresistant. The isolates showed resistance to penicillin (n=13), oxacillin (n=13), ciprofloxacin (n=13), cefoxitin (n=12), erythromycin (n=9), fusidic acid (n=1) and clindamycin (n=1). This was confirmed by the presence of the genes: ermA, ermC, mphC, blaZ, msrA/B and vgaE. The virulence genes found were as follows: hla (n=11), hlb (n=8) and etA (n=7). Biofilm-related genes were expressed in at least 8 isolates. It is concluded that a better understanding of the characteristics of each strain causing infection, as well as antimicrobial susceptibility patterns, is needed to assist in the choice of the best therapy and the correct elimination of the biofilm from a "One Health" perspective.
Description: Dissertação de Mestrado em Biologia Clínica Laboratorial
URI: http://hdl.handle.net/10348/9649
Document Type: Master Thesis
Appears in Collections:DEBA - Dissertações de Mestrado
TD - Dissertações de Mestrado

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