Evaluation of the pre-analytical factors effect in the blood glucose concentration determination and iatrogenic hyperglycemia effect on leukogram values
Data
2020-03-09
Autores
Título da revista
ISSN da revista
Título do Volume
Editora
Resumo
There are recommendations specific for measuring blood glucose in serum or plasma and in both cases, it is very important that the samples be centrifuged for the separation of serum or plasma from blood cells, up to 1 hour postcollection. This is important because glycolysis continues in the in vitro blood cells.
In veterinary medicine, although delays between blood collection and analysis are common, in the bovine species, the effect of prolonged contact with the clot in the glucose concentration is not well established. The use of supplemented fluids with glucose is a common procedure and to date there is no published papers about the effect of spurious hyperglycemia in the leucocyte count in dogs and cats.
Thus this dissertation has two main objectives: to evaluate the glucose levels in paired samples of serum, plasma and fluoridated plasma belonging to bovine animals, in order to elucidate the effect of storage time and temperature in glucose concentration and, to formulate specific recommendations for sample storing and processing; to evaluate spurious hyperglycemia effect on the leucocyte cell count (total and differential count) in dog and cat blood with the ProCyte Dx hematological Analyzer (IDEXX).
For the first objective, the total blood samples were divided into tubes without additive, Fluoride/EDTA tubes and heparin lithium tubes. Samples were stored ate 25ºC and 4ºC and glucose concentration was determined 2h, 4h, and 8h after collection by on an automated biochemistry analyser (Randox RX Daytona™).
The results suggest that the mean concentration of glucose in the fluoridated plasma is not statistically different for both storage temperatures. In serum, the mean glucose concentration is statistically different when the samples are stored at 4ºC or at 25ºC. For plasma, the reduction in the mean concentration of glucose at 4 ºC or at 25ºC is not significant. The mean glucose concentration in the fluoridated plasma sample is not statistically different for the four post-harvest dosing times whereas for the serum and plasma samples, the average glucose concentration will decrease over time.
We conclude that the total blood storage at 4ºC limits the decline in glucose concentration by up to 8 hours of storage in fluoridated plasma samples. Storage exceeding 4 hours, even at 4ºC, should be avoided in serum and plasma samples to avoid significant changes in glucose concentration. At 25ºC, the contact time of the serum clot should not exceed 1 hour in serum and plasma samples and 2 hours in fluoridated plasma samples.
For the second objective, dog and cat blood samples were collected for EDTA tubes. The samples were experimentally "contaminated" with glucose to achieve a final concentration of 5%, 10% and 20% and were analysed in the ProCyte Dx ™ (IDEXX).
Any spurious hyperglycemia group don’t show statistical significant difference from hemodilution group. These results are observed both in dogs and cats. We can conclude that apparently spurious hyperglycemia has no effects in the leucocytes parameters.
Existem recomendações específicas para medir a glicose no sangue no soro ou plasma e, em ambos os casos, é muito importante que as amostras sejam centrífugas para a separação do soro ou plasma das células sanguíneas, até 1 hora após a coleta. Isto é importante porque a glicólise continua nas células sanguíneas in vitro. Na medicina veterinária, embora sejam comuns os atrasos entre a colheita e a análise de sangue, nas espécies bovinas, o efeito do contato prolongado com o coágulo na concentração de glicose não está bem estabelecido. O uso de suplementos líquidos com glicose é um procedimento comum e, até o momento, não há artigos publicados sobre o efeito da hiperglicemia espúria na contagem de leucócitos em cães e gatos. Assim, esta dissertação tem dois objetivos principais: avaliar os níveis de glicose em amostras pareadas de soro, plasma e plasma fluoretado pertencentes a bovinos, a fim de elucidar o efeito do tempo e temperatura de armazenamento na concentração de glicose e, formular recomendações específicas para armazenamento e processamento de amostras; avaliar o efeito da hiperglicemia espúria na contagem de células leucocitárias (contagem total e diferencial) no sangue de cães e gatos com o Analisador Hematológico ProCyte Dx (IDEXX). Para o primeiro objetivo, as amostras totais de sangue foram divididas em tubos sem aditivo, tubos de fluoreto/EDTA e tubos de heparina lítio. As amostras foram armazenadas a 25ºC e 4ºC e a concentração de glicose foi determinada 2h, 4h e 8h após a colheita num analisador bioquímico automatizado (Randox RX Daytona ™). Os resultados sugerem que a concentração média de glicose no plasma fluoretado não é estatisticamente diferente para as duas temperaturas de armazenamento. No soro, a concentração média de glicose é estatisticamente diferente quando as amostras são armazenadas a 4ºC ou a 25ºC. Para o plasma, a redução na concentração média de glicose a 4ºC ou a 25ºC não é significativa. A concentração média de glicose na amostra de plasma fluoretado não é estatisticamente diferente nos quatro tempos de dosagem pós-colheita, enquanto nas amostras de soro e plasma, a concentração média de glicose diminui com o tempo. Concluímos que o armazenamento total de sangue a 4ºC limita o declínio na concentração de glicose até 8 horas em amostras de plasma fluoretado. O armazenamento superior a 4 horas, mesmo a 4ºC, deve ser evitado em amostras de soro e plasma para evitar alterações significativas na concentração de glicose. A 25ºC, o tempo de contato do coágulo sérico não deve exceder 1 hora nas amostras de soro e plasma e 2 horas nas amostras de plasma fluoretado. Para o segundo objetivo, amostras de sangue de cães e gatos foram colhidas para tubos de EDTA. As amostras foram "contaminadas" experimentalmente com glicose para atingir uma concentração final de 5%, 10% e 20% e foram analisadas no ProCyte Dx ™ (IDEXX). Qualquer grupo de hiperglicemia espúria não mostra diferença estatística significante em relação ao grupo de hemodiluição. Estes resultados são observados em cães e gatos. Podemos concluir que a hiperglicemia aparentemente espúria não tem efeitos nos parâmetros dos leucócitos.
Existem recomendações específicas para medir a glicose no sangue no soro ou plasma e, em ambos os casos, é muito importante que as amostras sejam centrífugas para a separação do soro ou plasma das células sanguíneas, até 1 hora após a coleta. Isto é importante porque a glicólise continua nas células sanguíneas in vitro. Na medicina veterinária, embora sejam comuns os atrasos entre a colheita e a análise de sangue, nas espécies bovinas, o efeito do contato prolongado com o coágulo na concentração de glicose não está bem estabelecido. O uso de suplementos líquidos com glicose é um procedimento comum e, até o momento, não há artigos publicados sobre o efeito da hiperglicemia espúria na contagem de leucócitos em cães e gatos. Assim, esta dissertação tem dois objetivos principais: avaliar os níveis de glicose em amostras pareadas de soro, plasma e plasma fluoretado pertencentes a bovinos, a fim de elucidar o efeito do tempo e temperatura de armazenamento na concentração de glicose e, formular recomendações específicas para armazenamento e processamento de amostras; avaliar o efeito da hiperglicemia espúria na contagem de células leucocitárias (contagem total e diferencial) no sangue de cães e gatos com o Analisador Hematológico ProCyte Dx (IDEXX). Para o primeiro objetivo, as amostras totais de sangue foram divididas em tubos sem aditivo, tubos de fluoreto/EDTA e tubos de heparina lítio. As amostras foram armazenadas a 25ºC e 4ºC e a concentração de glicose foi determinada 2h, 4h e 8h após a colheita num analisador bioquímico automatizado (Randox RX Daytona ™). Os resultados sugerem que a concentração média de glicose no plasma fluoretado não é estatisticamente diferente para as duas temperaturas de armazenamento. No soro, a concentração média de glicose é estatisticamente diferente quando as amostras são armazenadas a 4ºC ou a 25ºC. Para o plasma, a redução na concentração média de glicose a 4ºC ou a 25ºC não é significativa. A concentração média de glicose na amostra de plasma fluoretado não é estatisticamente diferente nos quatro tempos de dosagem pós-colheita, enquanto nas amostras de soro e plasma, a concentração média de glicose diminui com o tempo. Concluímos que o armazenamento total de sangue a 4ºC limita o declínio na concentração de glicose até 8 horas em amostras de plasma fluoretado. O armazenamento superior a 4 horas, mesmo a 4ºC, deve ser evitado em amostras de soro e plasma para evitar alterações significativas na concentração de glicose. A 25ºC, o tempo de contato do coágulo sérico não deve exceder 1 hora nas amostras de soro e plasma e 2 horas nas amostras de plasma fluoretado. Para o segundo objetivo, amostras de sangue de cães e gatos foram colhidas para tubos de EDTA. As amostras foram "contaminadas" experimentalmente com glicose para atingir uma concentração final de 5%, 10% e 20% e foram analisadas no ProCyte Dx ™ (IDEXX). Qualquer grupo de hiperglicemia espúria não mostra diferença estatística significante em relação ao grupo de hemodiluição. Estes resultados são observados em cães e gatos. Podemos concluir que a hiperglicemia aparentemente espúria não tem efeitos nos parâmetros dos leucócitos.
Descrição
Biochemistry Master Dissertation
Palavras-chave
Glucose , hyperglycemia