Análise proteómica de uma estirpe clínica de Staphylococcus aureus ST398 resistente à meticilina

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dc.contributor.advisorIgrejas, Gilberto
dc.contributor.advisorPoeta, Patrícia
dc.contributor.authorMonteiro, Ricardo Jorge Rego
dc.date.accessioned2015-12-03T15:21:13Z
dc.date.available2015-12-03T15:21:13Z
dc.date.issued2015-12-03
dc.descriptionDissertação de Mestrado em Genética Molecular Comparativa e Tecnológicapt
dc.description.abstractActualmente a proteómica é uma ferramenta muito utilizada na análise das diferenças na expressão de genes em estirpes bacterianas. Há muitos anos que Staphylococcus aureus tem sido reconhecido como um importante agente patogénico responsável por doenças humanas. A dificuldade no tratamento e o surgimento constante de múltiplas resistências a antibióticos têem feito deste organismo um importante foco de estudo. Para investigar este patógeno foram determinados, através de técnicas de electroforese bidimensional e técnicas de cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa, três proteomas diferentes de uma estirpe clínica de S. aureus resistente à meticilina (MRSA). Recorrendo à técnica 2-DE para obtenção do proteoma citoplasmático, foram excisados um total de 105 spots, nos quais, por correlação com as bases de dados de bioinformática, permitiram a identificação de 227 proteínas. No proteoma da superfície celular exposta foram identificadas 236 proteínas, assim como no proteoma extracelular foi possível identificar 99 proteínas. Identificaram-se proteínas relacionadas com funções-base da célula, mas também proteínas relacionadas com virulência e patogenicidade, tais como a catalase e a proteína isdA, principal responsável pela infecção em S. aureus, e proteínas relacionadas com a resistência aos antibióticos como as proteínas de membrana PBP. As duas classes com mais proteínas identificadas foram a glicólise, no proteoma intracelular, e a tradução nos outros proteomas da membrana celular exposta e extracelular, reflectindo assim um metabolismo activo. Estes resultados revelam a importância da proteómica no desenvolvimento do conhecimento da expressão proteica da estirpe de MRSA, microrganismo este com diversos e importantes mecanismos de resistência e patogenicidade. Este mapa proteómico global permite uma melhor compreensão deste agente patogénico, fornecendo assim novos dados para bancos de dados de proteínas.pt
dc.description.abstractProteomics is presently a powerful tool to analyze the differences in gene expression in bacterial strains. For many years Staphylococcus aureus has been recognized as an important pathogen and responsible for human diseases. The difficulty in treatment and constant new appearance of multiple antibiotic resistance has made this organism an important focus of study. To investigate this pathogen three different proteomes of a methicillinresistant clinical strains S. aureus (MRSA) were determined by techniques of twodimensional electrophoresis and liquid chromatography-mass spectrometry. Using 2-DE for cellular proteome were excised 105 spots, in which, for correlation with bioinformatics databases, we identified 227 proteins. Considering the exposed cell surface proteome and the exoproteome, 236 and 99 proteins were identified respectively. Proteins related to basic cell functions were found, but also proteins related to virulence and pathogenicity, like catalase and isdA, main responsible for S. aureus infection, and proteins related to antibiotic resistance membrane proteins PBP. The two classes with more proteins identified were glycolysis in the intracellular proteome and translation in the othe exposed cell membrane and exoproteome, this reflects an active metabolism. These results highlight the importance of proteomics to development knowledge of protein expression of MRSA, this microorganism with several important mechanisms of resistance and pathogenicity. This global proteomics allows a better understanding of this pathogen, also providing new data for proteins databases.pt
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10348/5299
dc.language.isoporpt
dc.rightsopen accesspt
dc.subjectProteómicapt
dc.subjectProteínas de membranapt
dc.subjectProteoma (extracelular)pt
dc.subjectEspectrometria de massapt
dc.subjectStaphylococcus aureuspt
dc.subjectResistência microbiana a medicamentospt
dc.subject.udc575.11(043)pt
dc.titleAnálise proteómica de uma estirpe clínica de Staphylococcus aureus ST398 resistente à meticilinapt
dc.typemaster thesispt
dspace.entity.typePublicationen
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